【流column】管柱層析法Column |管柱層析法Column |有機實驗動手做 |

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不管你是專題生是研究生,本文提供即加入有機化學實驗室同學們,瞭解做有機化學實驗相關流程,有些基礎概念,後進入實驗室能上手。

本文內容是敍述我們做方法學實驗室流程、習慣,加上一些筆者經驗談,其他實驗室有流程及習慣,故同學們是要你們實驗室所教內容主,但我相信基本上有機實驗要做流程離不開這些,説流程:(6)測NMR,確認產物結構*萃取、純化、NMR部分敍述大致上流程,深入技巧會另外寫文章探討。

而以下是六項流程詳説,並添加一些筆者認為應該注意事項:每一次下反應要寫實驗紀錄簿,寫實驗紀錄簿目的於:*記錄你操作手法及流程是,有些化學反應不是將起始物全部丟進反應瓶,加溶劑攪一攪可以鬆。

(4)抽真空:確保我們反應會外界空氣幹擾,秤完藥後反應瓶拿去抽真空,抽完用血清塞塞後插上氮氣球。

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因此我們下反應流程記錄下來,後發現產率不如預期話,我們可以回過頭來查紀錄簿,看哪個流程需要改善,如果偷懶沒有紀錄話,很過一陣子忘了。

*畫TLC片是重點之一,跑片狀況如何和什麼樣溶劑極性跑片要記錄下來,後如果要做同樣反應,回來,節省試跑TLC片時間。

2.下反應(流程,若paper步驟有需求調整)(2)選擇反應瓶:看需求,可以選擇寬口或口圓底瓶、底瓶、雙頸瓶、三頸瓶、壓管(封管實驗),選好後磁石加入瓶中。

(3)秤藥:若藥物是,直接秤完加入反應瓶。
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如果藥是未知密度液體,可反應瓶放到秤台上歸零,秤液體進去。

若是已知密度液體,算出該加多少量體積,後加完溶劑pipet或針筒打入反應瓶。

(4)抽真空:確保我們反應會外界空氣幹擾,秤完藥後反應瓶拿去抽真空,抽完用血清塞塞後插上氮氣球。

(6)加入液體藥物:如果paper沒有特別説,我會加完溶劑再加液體藥物,因為擔心秤藥階段,藥加完直接加液體藥反應開始了(有時會放熱,反應瓶會燙,擔心反應會掉)。

(7)開始反應:記錄簿上記錄開始反應時間,若是高温反應,反應放進油浴鍋後急著離開,認油浴鍋温度會浮動後離開(若你試新條件,反應一下50度,一下變80度,這個反應條件不準了)。

(8)追蹤反應:試新條件時,每隔一段時間點TLC片追蹤反應,觀察起始物消耗狀況,有沒有點產生。

追蹤一段時間後,發現起始物消耗完了,或起始物完全沒有動,或是起始物有消耗但過了一段時間沒有繼續消耗,可以收反應了。
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*若是冰在冰箱藥物,記得藥拿出來退冰後才可以打開。

如果沒有退冰打開,罐內藥物吸收空氣中水份而掉。

*假設今天二氯甲烷萃取,若反應溶劑是二氯甲烷以外有機溶劑,要拿去迴縮機溶劑抽乾後才能進行萃取,否則有可能會出現有機層和水層難以分層情況。

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(1)點TLC片,確認反應結束後,記錄總反應時間及顏色變化,並TLC片狀況畫記錄簿上(話可以用貼)。

(2)我們實驗室例,大部分乙醚、乙酸乙酯(EA)或二氯甲烷(DCM)萃取。

(3)萃取時有機層和水層量,比例抓1:1。

(有些paper會告訴你多少有機溶劑和水去萃取)(4)萃取完後,收集有機層部分,裡面會有一些微量水萃掉,加入硫酸鎂水,鋪濾紙漏斗上,將濾液過濾到一個乾瓶子中,得到一瓶完全無水有機溶液(水沒除乾話,流column時化合物會卡column),會加入酸性、鹼性或中性和水溶液萃取兩次,第三次加入和食鹽水萃取。
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(5)利用迴縮機,多餘有機溶劑抽乾,抽乾後化合物轉移至底瓶。

(6)一次TLC片,確認萃取完TLC片狀況,二度TLC片狀況畫記錄簿上。

*假設今天二氯甲烷萃取,若反應溶劑是二氯甲烷以外有機溶劑,要拿去迴縮機溶劑抽乾後才能進行萃取,否則有可能會出現有機層和水層難以分層情況。

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七、管柱層析

是當反應用溶劑是醇類(甲醇、乙醇……)時,如果萃取前上濃縮機抽乾,萃取時醇類會所有有機物溶進水層。

*來説有機溶劑密度水小,故萃取時溶液收集上層。

要注意是二氯甲烷密度比水大,二氯甲烷萃取話要取下層。

*有時萃取會發生有機層和水層乳化分層現象,不想等待一段靜置時間話,加入和食鹽水可以消除乳化現象。

*上述第四點會説加入和食鹽水進行第三次萃取原因是,和食鹽水可以消除乳化現象,讓有機層和水層分層,這時小心操作漏掉水層,收集到有機層水量會,下一步不用加入多硫酸鎂水,因為有時加入多硫酸鎂水造成目標化合物卡硫酸鎂中。

*萃取時有機層和水層量比例加1:1,若有機層溶液加太少,你目標化合物有機會溶到水層去。

(1)流column前,要試著溶劑搭配或溶劑比例來跑TLC片,測試哪一種跑液適合拿來沖提column(理想狀況是,目標產物點RF值0.3位置)。

(2)Packing column,可用馬達加壓來加速,沒話可以用搖,讓silica gel和溶劑。

(3)Loading化合物到column中,結束後可加一些海砂(加入一公分高度),防止倒沖提液進去後,silica gel和化合物沖起。